石蜡包埋切片制作法

这是最常用的切片法。以石蜡作为组织的填充支持介质，将整块组织加以包埋，***凝固成均匀一致的固态结构。用切片机制取极薄的切片。为了让石蜡能浸入组织内部，需将组织经过脱水等处理。过程大致如下：

⑴固定：生物标本脱离机体或培养环境，细胞会发生自溶，腐败分解。因此，需用固定剂处理，使蛋白质凝固停止濒死或死后变化。凡供***保存的标本都需经固定处理。

常用的固定剂是甲醛、乙醇等，能使蛋白质凝固。还有由几种试剂配成的固定液，例如Carnoy固定液，由无水酒精、氯仿、冰醋酸配成，固定力更快更强，不含水分，可避免水溶性物质如糖原等在固定过程中损失。

制作方法

脱水：是将组织细胞所含水分除去。通常用乙醇（Alcohol，酒精），浓度递升到 ***。此过程还使组织块进一步硬化。

透明：是用既能溶于纯酒精又能融解石蜡的有机溶剂，将组织中的酒精取代，以便石蜡浸入。通常用二甲苯（xylene）为透明剂。

浸蜡：在温箱内进行。已透明的组织块放入加热融解的石蜡中，让石蜡浸透组织，作为支持介质。

包埋：将已浸蜡的组织块放入热融的包埋石蜡中，迅速冷凝，组织决便被蜡包埋。

切片：用切片机。常用的切片机有轮转式、平推式的。用轮转式的易于切出连续切片。切片厚度随制片目的而调整。教学标本厚度多是5~6μm。

贴片烤干：石蜡切片在温水上展平后，移在玻片上，烤干，即可供染色处理。染色后用树胶、盖坡片封固，可***保存。

包埋

　　①包埋一般用硬蜡，即熔点为60-62℃的石蜡。包埋用的石蜡熔点要和浸蜡用的石蜡熔点相一致。

　　②包埋用的石蜡温度药稍高于浸蜡的温度，维持在65-68℃，但是不可过高，否则易造成组织的***，而实验结果。

　　③包埋过程操作要迅速，以免在组织块尚未埋妥前熔蜡凝固。

　　④黏膜、囊壁、皮肤组织必须垂直于包埋盒的地面包埋，习惯称为立埋或立包。血管壁也应立埋。

切片

　　①切片刀要锋利，刀口无缺损，才能切出完整的薄片。目前多用一次性刀片切片，切片质量良好。若用重型全钢刀，则要经常研磨，以保持其锋利、无缺损。

　　②骨与其它钙化组织必须先脱去钙盐，再经述各步骤处理后，才能切片。