冷冻切片法

冷冻切片法是借组织在低温下，冻结变硬而达到符合切片要求。冷冻切片法需有冷冻切片机，或在普通切片上配制冷设施。恒冷切片机是***冷冻切片设备。它有一个恒冷箱，标本致冷台和切片机都装在箱内。恒冷箱的作用类似冰箱，可在一定范围内调整温度，其结构有利于保持箱内恒定低温，减少箱门打开时环境温度的干扰。切片机的轮转把手装在箱外，便于操纵切片。

冷冻切片法的优点是：在处理得当时，它可以限度地保持组织的新鲜状态。并且，由于不需经脱水、透明、浸蜡等过程中有机溶剂的处理，及湿箱浸蜡热的影响，甚至可不经固定。所以能很好地保存组织细胞的各种成分和酶的活性，因此在酶的组织化学研究中常用此切片法。

透明：因脱水剂不能与包埋介质相溶，因而包埋前应用能与包埋介质相溶的化学试剂将组织中的脱水剂置换出来，该过程即为透明。在这个过程中，组织快中的乙醇被媒介溶剂（即透明剂，如二甲苯）取代，因其折光率接近组织蛋白的折光率，光线可以透过，使组织块呈现不同程度的透明状。

　　二甲苯为无色透明液体，透明能力强，但易使组织块收缩、变硬变脆，因此组织块在二甲苯中时间不宜过长，以达到组织透明为度（组织块呈现棕黄色或暗黄色透明状即可）。另外，苯、甲苯与二甲苯性质相似，也可作透明剂使用。二者对组织块收缩较少，不易使组织硬化变脆，但透明速度慢，需要60min左右。氯仿的透明能力不如二甲苯，且挥发快，容易吸收水分，多用于大组织块（厚1cm）的透明，透明时间为12-24h。

透明：因脱水剂不能与包埋介质相溶，因而包埋前应用能与包埋介质相溶的化学试剂将组织中的脱水剂置换出来，该过程即为透明。在这个过程中，组织快中的乙醇被媒介溶剂（即透明剂，如二甲苯）取代，因其折光率接近组织蛋白的折光率，光线可以透过，使组织块呈现不同程度的透明状。

　　二甲苯为无色透明液体，透明能力强，但易使组织块收缩、变硬变脆，因此组织块在二甲苯中时间不宜过长，以达到组织透明为度（组织块呈现棕黄色或暗黄色透明状即可）。另外，苯、甲苯与二甲苯性质相似，也可作透明剂使用。二者对组织块收缩较少，不易使组织硬化变脆，但透明速度慢，需要60min左右。氯仿的透明能力不如二甲苯，且挥发快，容易吸收水分，多用于大组织块（厚1cm）的透明，透明时间为12-24h。